如圖是將人類的生長(zhǎng)激素基因?qū)爰?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”的示意圖，所用的載體為質(zhì)粒A。已知細(xì)菌B細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因，質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌B后，其上的基因能得到表達(dá)。簡(jiǎn)述重組質(zhì)粒的主要過(guò)程包括：①（）；②（）；③（）。

在形成圖中③的過(guò)程中，獲取②的途徑主要有從基因文庫(kù)中獲取、（）、人工合成。

有人對(duì)這種牛奶不敢食用，人們對(duì)這種轉(zhuǎn)基因食品的擔(dān)心表現(xiàn)在擔(dān)心出現(xiàn)（）效應(yīng)，擔(dān)心出現(xiàn)新的（），擔(dān)心營(yíng)養(yǎng)成分改變。

有人設(shè)想將羊體細(xì)胞與牛體細(xì)胞進(jìn)行融合，以獲得新物種“羊一?！?，你認(rèn)為依據(jù)目前的生物技術(shù)和理論能否實(shí)現(xiàn)這一構(gòu)思？你的理由是什么？

被①處理后的分散細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，通常要在培養(yǎng)液中添加一定量的（），此外應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以便保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)。

導(dǎo)入細(xì)菌B細(xì)胞的目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志是什么？

若要獲得抗病基因，能否用限制酶SmaⅠ對(duì)圖中對(duì)應(yīng)的位點(diǎn)進(jìn)行切割？說(shuō)明理由。要獲得含抗病基因的重組質(zhì)粒能否用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割質(zhì)粒？

圖中的III是導(dǎo)入了目的基因的受體細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)、篩選最終獲得一株有抗蟲特性的轉(zhuǎn)基因植株。經(jīng)分析，該植株含有一個(gè)攜帶目的基因的DNA片段，因此可以把它看作是雜合子。理論上，在該轉(zhuǎn)基因植株自交產(chǎn)生的F1中，仍具有抗蟲特性的植株占總數(shù)的（），原因是（）。

基因工程操作的基本步驟是：①（）；②（）；③（）；④（）。

科學(xué)家在培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因植物時(shí)，常用（）中的質(zhì)粒做運(yùn)載體。