降鈣素是一種多肽類激素,臨床上用于治療骨質(zhì)疏松癥等。人的降鈣素活性很低,半衰期較短。某科學(xué)機(jī)構(gòu)為了研發(fā)一種活性高、半衰期長(zhǎng)的新型降鈣素,從預(yù)期新型降鈣素的功能出發(fā),推測(cè)相應(yīng)的脫氧核苷酸序列,并人工合成了兩條72個(gè)堿基的DNA單鏈,兩條鏈通過18個(gè)堿基對(duì)形成部分雙鏈DNA片段,再利用游離的脫氧核苷酸和Klenow酶補(bǔ)平,獲得雙鏈DNA,過程如下圖。在此過程中發(fā)現(xiàn),合成較長(zhǎng)的核苷酸單鏈易產(chǎn)生缺失堿基的現(xiàn)象。請(qǐng)據(jù)圖回答:
經(jīng)DNA測(cè)序表明,最初獲得的多個(gè)重組質(zhì)粒,均未發(fā)現(xiàn)完全正確的基因序列,最可能的原因是()。
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②、③階段是否可使用同種培養(yǎng)基?理由是什么?
普通番茄細(xì)胞導(dǎo)入目的基因后,先要接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng),經(jīng)脫分化過程后得到愈傷組織,然后再轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上,誘導(dǎo)出試管苗,然后進(jìn)一步培養(yǎng)成正常植株。獲得的轉(zhuǎn)基因植物經(jīng)有性生殖獲得的后代,是否也具有轉(zhuǎn)基因特性?
“分子縫合針”是()。
操作步驟:從人的()獲取目的基因;目的基因與()結(jié)合構(gòu)建基因表達(dá)載體;在基因表達(dá)載體中還應(yīng)插入()和終止子。然后把基因表達(dá)載體導(dǎo)入牛的(),通過發(fā)育形成的牛體細(xì)胞含人的(),成熟的牛產(chǎn)的的奶中含有(),證明基因操作成功。
如圖是將人類的生長(zhǎng)激素基因?qū)爰?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”的示意圖,所用的載體為質(zhì)粒A。已知細(xì)菌B細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A,也不含質(zhì)粒A上的基因,質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌B后,其上的基因能得到表達(dá)。簡(jiǎn)述重組質(zhì)粒的主要過程包括:①();②();③()。
若要獲得抗病基因,能否用限制酶SmaⅠ對(duì)圖中對(duì)應(yīng)的位點(diǎn)進(jìn)行切割?說明理由。要獲得含抗病基因的重組質(zhì)粒能否用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割質(zhì)粒?
“分子運(yùn)輸車”是()。
圖中涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有()(至少寫三種)。
圖中的III是導(dǎo)入了目的基因的受體細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)、篩選最終獲得一株有抗蟲特性的轉(zhuǎn)基因植株。經(jīng)分析,該植株含有一個(gè)攜帶目的基因的DNA片段,因此可以把它看作是雜合子。理論上,在該轉(zhuǎn)基因植株自交產(chǎn)生的F1中,仍具有抗蟲特性的植株占總數(shù)的(),原因是()。
在獲得目的基因的過程中,PCR技術(shù)相當(dāng)重要。PCR擴(kuò)增反應(yīng)需要在一定的緩沖溶液中加入DNA模板、分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種()、四種脫氧核苷酸和()的DNA聚合酶。